Визначення резидентності насіння

Резистентність це показник якості насіння, його стійкості до 1%-ному розчину хлористого натрію. Вона визначається кількістю мілілітрів розчину, потрібного для того, щоб припинити поступальний рух сперматозоїдів. Для визначення резистентності в три флакони з-під пеніциліну наливають 1%-ний розчин хлористого натрію. У перший флакон наливають 10, в другій 0,5, в третій 0,25 мл. Потім мікропіпеткою додають в перший флакон 0,02 мл нерозбавленого або розбавленого насіння (кінчик піпетки попередньо обтирають) і змивають залишки насіння розчином з піпетки і змішують. Одну краплю цього розчину наносять на предметне скло і розглядають під мікроскопом.

Якщо у живчиків активне поступальний рух, 0,5 мл розчину з першого флакона переносять у другій. Після змішування ставлять на 3 хвилини і досліджують краплю розчину з цього флакона під мікроскопом. Якщо в ньому є живчики з поступальним рухом, з другого флакона переносять 0,25 мл в третій флакон. Якщо в цій краплині виявлені активно рухливі живчики, піпеткою додають 0,5 мл розчину хлористого натрію і знову дивляться під мікроскопом. Так продовжують до тих пір, поки сперматозоїди припинять поступальний рух.

Остаточний результат визначається за спеціальною таблицею. Пережіваемость насіння визначають під мікроскопом в термостаті при температурі 40-42°. Для цього краплю насіння змішують з краплею 2,8%-ного розчину лимоннокислого натрію або 1%-ного розчину хлористого натрію. При звичайному розведенні насіння визначають протягом трьох-чотирьох днів. Зберігають насіння при 0°. За цей час активність його повинна бути не менше 0,6 бала.

Величина дихання сперматозоїдів визначається за часом знебарвлення розчину метиленової синьки. Швидкість знебарвлення розчину синьки при температурі 18-20° пропорційна кількості живих живчиків і інтенсивності їх дихання. Для визначення цього показника застосовується 0,01%-ний розчин метиленової синьки (0,5 г синьки змішують з 200 мл 1%-ного хлористого натрію). Розчин зберігають три дні. Потім беруть 10 мл його і додають 90 мл розчину 1%-ного хлористого натрію, добре збовтують і отлпзают 40 мл, до яких додають ще 60 мл 1%-ного хлористого натрію.

Коли розчин готовий, одну краплю досліджуваного нерозбавленого насіння і краплю цього розчину змішують на предметному склі і всмоктують в скляну трубку (звичайний зіпсований шприц для осіменіння корів або мікропіпетки). Насіння хорошої якості знебарвлюється за 5-10, середнього-до 30 і поганого - більше 30 хвилин.

Вы в разделе: Искусственное осеменение